氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單元，具有極其重要的生理功能。組氨酸（L-Histidine，His或H），分子式C6H9N3O2，是存在于蛋白質(zhì)之中最普遍的20種氨基酸之一，一種堿性氨基酸，對(duì)成人為非必需對(duì)幼兒為必需氨基酸，現(xiàn)主要應(yīng)用于醫(yī)藥工業(yè)，是氨基酸輸液和綜合制劑的主要成分，為了提高生產(chǎn)率改進(jìn)生產(chǎn)工藝，應(yīng)建立一種簡(jiǎn)便的對(duì)生物制品中的組氨酸含量的檢測(cè)方法。

目前，氨基酸含量檢測(cè)主要應(yīng)用氨基酸分析儀和高效液相色譜HPLC。氨基酸分析儀利用離子交換色譜，經(jīng)過(guò)吸附、穿透、擴(kuò)散、離子交換、離子親和力等復(fù)雜的物理化學(xué)過(guò)程對(duì)氨基酸準(zhǔn)確定量檢測(cè)。高效液相色譜HPLC技術(shù)分析氨基酸也是一種較為理想的氨基酸檢測(cè)方法，高效快速準(zhǔn)確，逐步代替了氨基酸自動(dòng)分析儀，實(shí)驗(yàn)室分享一種利用反相高效液相色譜法檢測(cè)組氨酸含量的方法并通過(guò)全面的方法學(xué)驗(yàn)證。

考慮到組氨酸不含生色基團(tuán)，無(wú)法采用常規(guī)的紫外檢測(cè)器直接檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)條件中增加通過(guò)衍生劑，將氨基酸轉(zhuǎn)化為具有較強(qiáng)紫外或熒光吸收的衍生物。通過(guò)樣品制備、色譜柱選擇、HPLC條件優(yōu)化，對(duì)樣品進(jìn)行分析，最后對(duì)結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，得到組氨酸的含量結(jié)果。色譜條件紫外檢測(cè)器檢測(cè)，波長(zhǎng)為254nm，進(jìn)樣體積為5μL，柱溫為25℃，流速為1.0ml/min，洗脫時(shí)間為35min，洗脫方式為梯度洗脫。

利用高效液相色譜HPLC的方法具有良好的專屬性、準(zhǔn)確度、重復(fù)性、中間精密度、線性和耐用性，按照中國(guó)藥典中分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則和ICH協(xié)調(diào)三方指導(dǎo)原則Q2進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證方法，符合驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。是一種較為理想的檢測(cè)氨基酸的方法，能夠?yàn)榻M氨酸含量的檢測(cè)提供參考，隨著氨基酸的廣泛應(yīng)用，對(duì)氨基酸的檢測(cè)分析水平也不斷提高，利用組氨酸含有的咪唑基，報(bào)道也可以采用離子色譜對(duì)其含量進(jìn)行檢測(cè)。

利用高效液相色譜對(duì)組氨酸含量進(jìn)行檢測(cè)是一項(xiàng)復(fù)雜的過(guò)程，需要嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)條件和專業(yè)的操作技能。微源檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室采用高效液相色譜(HPLC)和液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)法，可高效、精準(zhǔn)的檢測(cè)組氨酸含量變化，為各科研院所、藥企、生物技術(shù)、化工領(lǐng)域等企業(yè)提供高效、準(zhǔn)確的氨基酸及其代謝物檢測(cè)服務(wù)，滿足質(zhì)量控制和研發(fā)支持，如您有這方面的測(cè)試需求，歡迎致電咨詢！