關(guān)鍵詞：GST融合蛋白Pull-down技術(shù)結(jié)合質(zhì)譜聯(lián)用的蛋白互作分析,GST下拉蛋白質(zhì)譜,GST質(zhì)譜,GST做質(zhì)譜,gst融合蛋白沉降技術(shù),GST融合蛋白篩選互作蛋白,蛋白質(zhì)組學(xué),代謝組學(xué),tmt,抗體測(cè)序,itraq,蛋白質(zhì)譜鑒定"

GST融合蛋白Pull-down技術(shù)也稱(chēng)GST pull-down或GST pull-down融合蛋白沉降技術(shù)，是在GST融合蛋白以及Pull Down技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的研究體外蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用的技術(shù)，實(shí)質(zhì)上是一種利用谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶（GST）作為親和標(biāo)簽進(jìn)行的Pull-down實(shí)驗(yàn)。

該技術(shù)利用基因重組技術(shù)得到GST標(biāo)記的融合蛋白，再利用GST對(duì)谷胱甘肽（GSH）偶聯(lián)磁珠的親和性將帶GST標(biāo)記的融合蛋白與谷胱甘肽偶聯(lián)磁珠結(jié)合，當(dāng)與融合蛋白有相互作用的靶蛋白通過(guò)載有該磁珠的層析柱或與該磁珠混合時(shí)，靶蛋白就會(huì)與融合蛋白產(chǎn)生吸附而從蛋白混合液中分離出來(lái)，通過(guò)純化洗脫就可以得到與融合蛋白相互作用的靶蛋白。

被GST拉下的靶蛋白利用質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行分析，即GST pull-down結(jié)合質(zhì)譜分析技術(shù)，可以實(shí)現(xiàn)靶蛋白的定性鑒定和確認(rèn)，該蛋白可以是已知的也可以是未知的，可以用于驗(yàn)證兩種已知蛋白之間可能存在的相互作用以及尋找能與已知的融合蛋白發(fā)生相互作用的未知蛋白分子。

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